红掌切花组培叶片愈伤组织诱导技术

红掌切花组培叶片愈伤组织诱导技术：

1.外植体的选择：在田间选择符合品种特征，无虫害，长势健壮的植株，选择开始展开但未平展的新叶，从叶柄部取下。

2.外植体的处理：在实验室中切去叶柄，放盆中加洗涤灵清洗表面尘土，清水冲洗干净后，将叶片切成约1cm的方片，注意避开叶脉，重新加入洗涤灵浸泡30分钟，流水冲洗2小时。

3.外植体表面灭菌：在超净工作台中将叶片进行表面灭菌，一般采用组合灭菌方法，先以75%酒精浸泡30秒，再转入灭菌液中灭菌，灭菌液可选择次氯酸钠、新洁尔灭、升汞等，根据灭菌液种类、浓度实验选择灭菌时间，灭菌后以无菌水冲洗干净。

4.接种：将经表面灭菌清洗干净的叶片块用无菌滤纸吸去水分，去掉边缘部分留中间长0.5cm的叶片块接种在培养皿中，一个培养皿可接多块，培养基成分为1/2MS附加6-BA2mg/L，2.4-D0.5mg/L,接种后立即封闭培养皿。

5.培养：将接有叶片块的培养皿放置在25±1℃的培养箱中暗培养，约30天后叶片块边缘形成米粒状淡黄色愈伤组织。