葡萄组培育苗技术要点

用组织培养法繁殖葡萄，可达到优良葡萄快速育苗的目的，以满足生产需要。同时也是工厂化育苗和脱毒苗木快速繁殖的重要手段，并能常年进行，缩短了苗木繁殖周期，加快新品种的推广应用。

一、试管苗的初代培养

葡萄组织培养初代培养，其繁殖材料多取自大田，常带有大量细菌和霉菌，必须进行消毒方可获得无菌材料。材料采集在前三天无雨的晴天上午进行，取带腋芽的葡萄半木质嫩茎，剪取后立即拿入室内，先用自来水反复冲洗，除去病虫枝、残伤枝，减除大叶片，装入广口瓶进行消毒。用无菌操作技术，倒入无菌水浸泡和冲洗，倒去无菌水，加入0．1％升汞浸没材料，并剧烈摇动6分钟～9分钟，剪去受伤端面，剪成单芽茎段，接入培养基中。每瓶插一段，正插入内。标号后放到培养室培养，一周后检查，如未污染，基本上不会再污染。通过对美人指、早红提等品种的生产，取得了90％以上无污染成苗率。

二、试管苗的继代繁殖

对初代培养合格或引进的试管苗，一般采用MS、B5、GS等培养基，具体做法如下：

1．穿好工作服，戴上工作帽，用洁净的水洗手，再用75％的酒精棉球擦手消毒。

2．取无菌原种苗瓶放于超净台，用75％酒精棉球仔细擦试包头纸及苗瓶外体，并解开包头纸捆扎线绳。

3．将弯剪刀、枪状镊子浸入75％酒精中，用时取出在火焰上烧15秒～30秒，凉冷备用。

4．将无菌原种苗瓶的包头纸连同棉塞一同拔下，放在超净台一旁，瓶口在火焰上烧5秒～10秒，用冷却的剪刀将瓶内小苗剪成单芽茎段，下端稍长，上端较短，但剪口距芽至少0．5厘米以上。母株基部要留一芽，使其再发。剪下的单芽茎段，用无菌镊子逐个夹出，放入新的培养基瓶内，并使叶子和芽露出培养基上方。150毫升三角瓶插5个左右茎段，插完后将瓶口在火焰上转动烧一遍，旋好棉塞和包上包头纸，用绳扎好，注明名称和时间等。如此反复的接好所有苗子，并放到培养室。一般每月转接增殖3次。

三、试管苗的培养

将接种后的培养苗瓶，放在培养室的培养架上，培养室昼夜温度保持在22℃～28℃，新转接的苗瓶应放在培养架上层，上层温度略高易于生根。培养室的湿度以70％为宜，光照2000～3000勒克斯的日光灯。

四、移栽

时期多在冬季或春季进行。

1．光培炼苗。培养室培养的试管苗生长达瓶口，有3枚～4枚正常叶片时，根系生长良好，连同培养瓶转入温室或大棚内，逐步去掉瓶塞，放在干净的温室中，在2万～4万勒克斯的自然光下炼苗5天～7天，当瓶口长出油亮的叶片，幼茎变淡红色时即可出瓶。

2．沙培炼苗。最好备有下铺电热线并能调节温度的沙床，使床温维持在25℃左右。以0．6厘米间距布置电热线，其上铺垫2厘米的土，压平，再铺8厘米～10厘米的干净细河沙，湿度以12％左右，即手捏成团落地能散。

清晨或傍晚，将培养瓶内的幼苗轻轻倒出，洗掉根上附着的培养基，栽入沙床，3厘米～4厘米株距，8厘米～10厘米行距，每平方米大约栽400苗～500苗。栽入沙床后，盖好小拱棚，最初3天，棚内温度保持在25℃左右，最高不超过30℃，最低不低于20℃。相对湿度保持在80％～95％；光照0．7万～1万勒克斯。6天～7天后，拆除临时小拱棚。

3．温室营养袋炼苗。经沙培后的合格苗，小心挖出，在空气湿度不低于70％，温度20℃～25℃，无直射光下，栽入肥土：沙：腐熟有机肥为1：1：0．2的营养钵中，最初几天对温、光、湿的管理同沙培苗相同。

4．大田苗圃移栽。选土质疏松肥沃，排灌水方便，距温室较近且日照良好的地块作苗圃，将营养袋苗移栽即可。小苗有3个月的生长期，并及时打掉副梢，促进枝芽老化成熟，达到合格优质苗。