（１）无菌室和分离用器具的灭菌和消毒 分离蜜环菌菌种的
操作过程，应该在很清洁的条件下严格按照无菌操作技术进行，无
菌室、无菌箱或洁净工作台都应保持清洁，必要时可用 ０? １％升汞
溶液或 ７０％乙醇擦拭工作台。 微生物一般都是附着在尘埃上、悬
浮于空气中，可在室内喷雾或煮沸水的方法，使空气中水汽饱和，
尘埃与水滴同时降落，除去空气中的微生物。 分离时所用的培养
皿、刀剪、接种铲等用具及工作人员的工作服都应进行无菌处理，
工作人员操作时不能在操作间走动，防止带来杂菌。
（２）消毒液的配制
①无菌水 即高压灭菌后的自来水。 将适量的自来水装入三
角瓶中，塞好棉塞，然后进行高压灭菌，装入水量不宜太多，防止高
压灭菌时弄湿棉塞。 无菌水不应保存过长时间，防止污染。
②常用的消毒液 ０? １％升汞溶液、漂白粉、７０％酒精溶液。
此外，５％福尔马林、３％过氧化氢、２％高锰酸钾等都可用做表面消
毒，处理时间和浓度因材料不同而异，处理后都应用无菌水冲洗。
（３）排除细菌污染 细菌污染是分离真菌的大敌，目前抑制
细菌生长有效的方法是在培养基中加入适当的抗生素。 加金霉素
（３０ 微克 ／ 毫升）可抑制多数细菌生长，加青霉素（２ 微克 ／ 毫升）可
抑制革兰氏阳性细菌生长，加多黏菌素 Ｂ（０? ５ 微克 ／ 毫升）可抑制
革兰氏阴性细菌生长，加链霉素（４０ 微克 ／ 毫升）和氯霉素（５０ 微
克 ／ 毫升）可以抑制大部分细菌生长，除氯霉素可在制作培养基时
灭菌前加入外，其他抗生素都应在培养基灭菌后冷却至 ４５℃ 左右
时再加入。 此外，可调节培养基的 ｐＨ 值，酸性培养基对大部分细
菌都有抑制作用，而并不影响真菌生长。
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