蜜环菌菌种生产是采用严格的无菌操作技术、大量培养繁殖
菌种的过程。 用于生产的蜜环菌菌种必须经过母种、原种、栽培种
等三级菌种生产过程。 这三级菌种生产又需经过菌种转接、扩大
培养到所需要的数量，方可投入大面积生产。
（１）接种 是将所需要的蜜环菌菌种移植到适宜其繁殖生长
的培养基上的操作。
①蜜环菌母种接种 即为原始菌种，也称为一级菌种，是从蜜
环菌孢子分离或组织分离所获得的纯菌丝体。 蜜环菌母种的扩大
培养也称为继代培养，或称移植、转接、转管等。 自行分离或引种
的原始菌种一般数量很少，不直接用作培养原种，需进行扩大转
接，一部分用来继续转接母种，一部分用于保藏。 从保藏条件下转
管活化扩大培养的菌种，也为一级母种，可直接转入原种生产。 母
种培养一般常用玻璃试管培养基培养，便于观察、鉴别，且易于
保藏。
②蜜环菌原种接种 蜜环菌原种也称为二级菌种，一般用玻
璃广口瓶或罐头瓶生产。 蜜环菌原种的接种过程也要严格遵守无
菌操作规程。 用右手拔去灭过菌培养基广口瓶的棉塞，将瓶固定
在瓶架上，并靠近火焰 １ 厘米左右的无菌区，取母种试管，酒精擦
拭管壁，去棉塞后在火焰上烧灼管口，接种铲经过火焰火苗，迅速
插入试管内，冷却后取 ２ 厘米大小一块母种，送入菌种瓶内，固定
在培养基的接种孔中。 母种为液体时，可直接将培养好的菌液倒
入原种瓶。 １ 瓶液体菌种可接 ８ ～ １５ 瓶原种。 接种完毕用牛皮纸
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包好，扎上橡皮圈，即可移入培养室。
③生产种接种 生产种也称为三级菌种，一般用玻璃广口瓶、
塑料袋生产。 生产种的接种过程，操作者也应严格遵照无菌操作
的程序进行，待培养基瓶（袋）高压灭菌冷却后，即可移入接种间。
选择无杂菌污染、菌丝已长满菌种瓶的原种，用酒精棉球擦拭瓶壁
和瓶口外，揭去牛皮纸，棉塞的瓶外部分在火焰上燎烧，杀死可能
沾染的杂菌，然后拔去棉塞，点燃酒精棉球燎烧瓶口内壁，将菌种
固定到接种架上，用火焰燎烧瓶口。 接种时用火焰上灭过菌的接
种铲，先将菌种表面老化的菌皮或已分化出的子实体原基去掉，然
后摇动原种，使其松动后并分成小块，迅速铲出一小块原种接入待
接瓶内培养基中间，稍压实。 火焰燎烧瓶口和棉塞后盖住瓶口，包
好封口纸。 用塑料袋生产三级菌种，袋不能直立、不宜火燎，接种
较困难，除接种室应严格灭菌外，接种后可将培养袋口下部在石灰
浆中浸泡片刻，起到密封的作用，接种后竖放在培养架上，不宜挤
压和翻动。
如果发现原种棉塞潮湿怀疑感染有霉菌，虽未发现培养基和
瓶内壁有杂菌菌落，也应弃之不用，如原种缺乏仍需用其扩大接种
时，则应用纸包好棉塞和瓶口，点燃酒精棉球擦拭和燎烧瓶壁与瓶
底，用铁器击穿瓶底，然后固定于接种架上，接种时只用从瓶底到
瓶壁 ２ ／ ３ 的原种，瓶口部分不用。 如果原种未长满菌种瓶，为争取
时间也可用长满半瓶的原种。 接种完毕，原种瓶要留一薄层菌种，
然后用酒精棉球擦拭瓶口内壁和外壁，棉塞燎烧后盖好菌种瓶，包
牛皮纸后移入培养室。 由于半瓶原种菌种瓶内空气较多，原种很
快会长满，又可用做原种转接。
（２）菌种培养 接种后的各级菌种都应放在适宜其生长的条
件下进行培养。 蜜环菌母种一般在恒温箱中 ２５℃ 条件下培养。
一般 ７ 天左右菌索长满培养基，即可转接原种。
原种和生产种数量较大，接种后立即放入培养室的培养架上。
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第五章 天麻栽培技术菌种培养条件主要应对温度、湿度、光线和空气进行调节，一般蜜
环菌菌丝体生长阶段不需要光线，而培养基在拌料装瓶（袋）时已
有一定的水分，故菌丝体培养阶段主要应控制好温度和通气条件。
①温度控制 温度影响菌索生长的速度、菌丝对培养基分解
能力的强弱、菌丝分泌酶的活性高低和菌索长得强壮程度。 在菌
种生产过程中，培养温度太高会造成菌种早衰，太低会导致菌索长
得缓慢，而延长生产周期。 因此，调节保持适宜的温度是一项重要
的工作。 蜜环菌应在 ２５℃左右条件下生长。
②通气条件 蜜环菌是好气性真菌，培养时应注意通风透气。
除装瓶（袋）时不宜过满，上部留出一定的空间，有利于生长外，在
菌种培养室内要有适当的通风窗，或有排风扇等机械设备进行通
风。 但通风和保温往往有矛盾。 尤其是冬季寒冷季节，通风会降
低培养室温度，为了能保持室内有一定的通气量，培养架不宜过
挤，菌种瓶（袋）摆放疏松些，同时可利用中午温度较高时，适当通
气，以利于菌种生长。
③湿度调节 菌种培养是在固定容器内生长菌丝体，只要培
养基水分适宜，培养室的湿度就很容易调控。 主要依据自然条件，
防止湿度过大杂菌滋生，可在室内定期撒生石灰吸潮，加强通风除
湿。 在培养后期，若湿度不够，可在培养室内喷水增大湿度。
④光线的调控 一般蜜环菌在菌丝体生长阶段，不需要光照，
需要有遮光设备，如将门窗挂上帘子。
控制好培养室的温度、湿度、光照等环境条件，对蜜环菌的培
养与生产是很重要的。
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