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墨兰组织培养

2023-11-10 05:38| 发布者: 李先生| 查看: 71| 评论: 0

组织培养就是根据植物细胞具有的全能性、再生能力和分生能力.从兰株体上取下茎尖分生组织,接种到培养基上,在无菌条件下,利用玻璃容器进行培养,使其形成新植株的方法。此方法是快速繁殖和保存种质材料及培育无病毒苗的一种好方法,是现代最先进的繁殖方法。
  一、组织培养的优越性
  
  1、能够保持母本的优良性状,使上一代的优良性状稳定地遗传下来。
  
  2、节约繁殖材料,采用一小部分茎尖、侧芽、幼叶尖、休眠芽或花序,就能繁殖出大量的中国兰花。
  
  3、快速。从优良的母本取一小块组织,在合适的条件下经过离体培养,一年之内就能繁殖出上万兰苗。例如,将墨兰初生茎的顶芽切割成2~3毫米,在一年内就能繁殖出上万甚至几十万株幼苗。
  
  4、节省土地。组织培养的材料是三角瓶或试管,可以充分利用空间。例如,一间30平方米的培养室就能摆放1万多个三角瓶,可繁殖几万株苗,且周转快,全年均可连续培养。
  二、组织培养的设备设施
  
  组织培养的设备包括准备室、接种室和培养室。具体设备有晾干架、实验台、药品柜、冰箱、PH计、高压消毒锅、培养基分装器、烘箱、温箱、搅拌器、离心机、电炉、蒸馏器、天平、软木塞打孔器、温湿调节设备、日光灯、培养架、转床、培养箱、超净工作台、接种箱、摇床、烧杯、培养皿、三角瓶、量筒、滴管、移液管、针筒、定容瓶、镊子、试管、剪刀、解剖刀、接种针。
  三、组织培养的操作方法
  
  1、植物材料的灭菌及切取
  
  从墨兰组织培养的外植体均取自分生组织,最常用的为茎尖。茎尖的切取应在无菌接种室的超净工作台上完成。选择生长旺盛的植株,剥去叶片,取下茎尖。先用无菌水清洗干净,除去残留的鞘、叶基等,再用70%~75%酒精浸泡10~30秒,取出后在5%~10%的漂白粉溶液中浸10~15分钟,再用无菌水冲洗干净,在实体显微镜下挑出茎尖生长点,立即接种到试管里的培养基上。
  
  2、培养基的配制
  
  用于组织培养的培养基与用于种子萌发的培养基基本上相似,但也不尽相同。下面介绍一种兰属植物适用的培养基,以供大家参考。
  
  培养基配方:花宝l号含量:3克,香蕉含量:30克,蛋白胨含量:2克,苹果含量:20克,甘氨酸含量:0.02克,蔗糖含量:25克,肌醇含量:0.1克,甘露醇含量:1克,卡基腺嘌呤含量:0.002克,琼脂含量:12克,腺嘌呤含量:0.002克,椰子水含量:50亳升,蒸馏水含量:加至1000毫升。
  
  3、培养原球体
  
  接种30~45天后.形成小而圆的原球体。将原球体一分成四,放到培养基上培养,30~60天后,又可长出原球体,按照上述方法重新培养,这样,在短时间可获取大量的原球体。
  
  4、旋转培养
  
  将原球体切割成组织,放入试管内的液体培养基中,立即放于旋转培养床上旋转培养。
  
  5、分化培养
  
  在旋转培养床上培养一段时间后,小块稍微长大,取出接种在分化培养基上,放于分化室中培养15天左右,逐渐长出芽和根,进一步形成兰花小植株。
  
  6、移植试管苗
  当兰花苗长出3~4片叶.具3~4条根后,可进行移植。移植之前应打开瓶盖,使之逐渐适应新的环境,然后从试管中取出幼苗,用自来水轻轻冲洗,把附着在幼苗上的培养基等杂物冲洗干净,然后移植于培养土或蛭石等基质中,放在温室中培养。
  
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